色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對液相色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。
 

　　市售的用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、多孔碳等，其粒度一般為3，5，7，10um等，柱效理論值可達5～16萬(wàn)/米。
 

　　對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析，只要500即可;對于較難的分離物質(zhì)對則可采用高達2萬(wàn)的柱子，因此一般10～30cm左右的柱長(cháng)就能滿(mǎn)足復雜混合物分析的需要。
 

　　柱效受柱內外因素影響，為使色譜柱達到最佳效率，除柱外死體積要小外，也要有合理的柱結構(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。
 

　　即使*裝填技術(shù)，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流，流速較快，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應。
 

　　這種管壁區大約是從管壁向內算起30倍料徑的厚度。在一般的液相色譜系統中，柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。
 

　　1、柱的構造
 

　　液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70Kg/cm2時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內壁要求有很高的光潔度。
 

　　為提高柱效，減小管壁效應，不銹鋼柱內壁多經(jīng)過(guò)拋光。也有人在不銹鋼柱內壁涂敷氟塑料以提高內壁的光潔度，其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板，是燒結不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2-20um(5-10um),取決于填料粒度，目的是防止填料漏出，柱內徑一般是根據柱長(cháng)、填料粒徑和折合流速來(lái)確定，目的是為了避免管壁效應。
 

　　2、柱的填充
 

　　液相色譜柱的性能除了與固定相性能有關(guān)外，還與填充技術(shù)有關(guān)。在正常條件下，填料粒度>20um時(shí)，干法填充制備柱較為合適;顆粒<20um時(shí)，濕法填充較為理想。填充方法一般有四種：
 

　?、俑邏簞驖{法，多有用于分析柱和小規模制備柱的填充;
 

　?、趶较蚣訅悍?
 

　?、圯S向加壓法，主要用于裝填大直徑柱;
 

　?、芨煞?，柱填充的技術(shù)性強，大多數實(shí)驗室使用己填充好的商品柱。
 

　　必須指出，高效液相色譜柱的獲得，裝填技術(shù)是重要環(huán)節，但根本問(wèn)題還在于填料本身性能的優(yōu)劣，以及配套的色譜儀系統的結構是否合理。